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博瑞科生物鴨病毒性肝炎篩選與回歸試驗(yàn)

發(fā)布時(shí)間:2024-07-15

博瑞科生物

鴨病毒性肝炎篩選與回歸試驗(yàn)

鴨病毒性肝炎病毒篩選

1.1 分離病毒

從不同地區(qū)發(fā)病鴨場(chǎng)內(nèi)解剖感染病例,獲得病毒載量較高的器官--肝臟,經(jīng)研磨過濾后接種于10日齡鴨胚,鴨胚出現(xiàn)死亡后收獲尿囊液和胚體,經(jīng)研磨離心過濾后再次接種到10日齡鴨胚,重復(fù)以上過程,直至該毒株可使鴨胚穩(wěn)定死亡。

1.2  純凈性檢測(cè)

將篩選到的病毒進(jìn)行細(xì)菌、真菌、支原體及其他常見病毒檢測(cè)。

1.3 鴨胚培養(yǎng)與毒價(jià)測(cè)定

將1.1獲得的胚毒用于檢測(cè)病毒毒價(jià),如表1所示。根據(jù)所得病毒毒價(jià),將1型毒株分離株1、分離株2、分離株4和3型毒株分離株6、分離株8接種到4日齡雛鴨進(jìn)行動(dòng)物回歸實(shí)驗(yàn)。鴨胚半數(shù)致死量(ELD50)用Reed-Muench法計(jì)算。

1.4 動(dòng)物回歸實(shí)驗(yàn)

將5個(gè)分離株回歸4日齡雛鴨,各10只,每天記錄死亡情況和剖檢觀察肝臟病變,結(jié)果見表2,將分離株2、分離株4和分離株6作為疫苗待選毒株。

雛鴨攻毒保護(hù)實(shí)驗(yàn)

1、2日齡健康未免疫雛鴨40只,由山東博瑞科生物技術(shù)有限責(zé)任公司研發(fā)部提供。

2、鴨病毒性肝炎精制蛋黃抗體(甘維康),由山東博瑞科生物技術(shù)有限責(zé)任公司質(zhì)控部提供。

3、鴨肝炎病毒(1+3)型病毒液,0.2ml含100ID50 ,由山東博瑞科生物技術(shù)有限責(zé)任公司質(zhì)控部提供。


雛鴨攻毒保護(hù)率檢驗(yàn)方法:

  1. 把40只2日齡雛鴨,分為1、2、3、4組,每組10只。

  2. 1組為健康對(duì)照組,不注射任何藥品,單獨(dú)隔離飼養(yǎng);2、3組為蛋黃抗體免疫組,每組分別肌肉注射0.5羽份、1羽份卵黃抗體;4組為攻毒對(duì)照組,每只注射生理鹽水0.5ml,隔離飼養(yǎng)。

隔24小時(shí)左右,2、3、4組分別肌肉注射鴨肝炎病毒1+3型病毒液0.2ml,繼續(xù)隔離飼養(yǎng),觀察10天,記錄死亡鴨子只數(shù)。

雛鴨攻毒保護(hù)率檢驗(yàn)法按暫行規(guī)程要求蛋黃抗體組保護(hù)率80%以上 ,對(duì)照組死亡數(shù)符合要求 ,抗體效價(jià)合格 。以上試驗(yàn)符合試驗(yàn)要求,兩種免疫劑量的雛鴨攻毒保護(hù)率分別為 90%和90%。

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